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实验动物的给法

(一)注she给药法

1. 皮射 注she时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或侧下腹部；豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位；至56dluan巢呈现多囊样改变，6个月后该病理改变呈渐进性发展趋势。兔在背部或耳根部注she；蛙可在脊背部淋巴囊注射；狗多在大腿外侧注she，拔针时，轻按片刻，防药液逸出。

2. 皮内注she 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内，观察其消失速度和局部血液循环变化，作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是：将动物注射部位的毛剪去，消毒后，用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内，然后使针头向上挑起并再稍刺入，即可注射药液。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码，此法编号清楚可靠，但只适于短期观察。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。

3. 肌肉注she 当给动物注she不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉注she。肌肉注she一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位，多选臀部。

注she时针头要垂直快速刺入肌肉，如无回血现象即可注she。给大、小鼠作肌肉注she时，选大腿外侧肌肉进行注she。

4. 腹腔注she 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒，然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进约0.5厘米，再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液、尿液后，缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。

5. 静脉注she 是将药液直接注she于静脉管内，使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。

小鼠、大鼠的静脉注she：常采用尾静脉注she。鼠尾静脉共有3根， 左右两侧和背侧各1根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采用。tang尿病模型tang尿病构建一般tang尿病模型构建的方法有：自发突变，饮食诱导，化学诱导，手术诱导，转基因/基因敲除等。操作时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75％酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈,注she时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。

睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm， 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上，对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上，周围是水环境,水深3 cm，平台在水面以上1 cm，于平台以上14 cm 处放笼罩，上面放水和食物。水温和室温保持在25 C，每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立，在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 时，由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头，大鼠落入水中而惊醒，再爬上站台。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时，要爱惜动物，使动物少受痛苦。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。

旷场实验( open field test， OFT )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱，底面平均分为25个小方格，正上方2 m处架一摄像机，镜头对准箱底，实验在安静环境下进行，大鼠置于方箱底面中心，同时进行摄像和计时，3 min 后停止摄像,更换动物后，继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备，观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分，后肢站立次数为垂直得分，两者之和为OFT总得分。结果jia亢方能降低jia亢大鼠xie清T3、T4、FT3、FT4含量,提高xue清TSH,以高剂量效果显著。REMSD实验前后均进行旷场实验。

shen大部切除所致的慢性衰模型

5/6shen切除手术一期法:成年雄性Wistar 大鼠，先切除右shen，随后结扎左shen上、下极并切除之，不要损伤两侧shen上腺。切除之shen组织称重，以右shen重量减去所切除的左shenshen组织重量来间接估算残余shen重量，并算出切除率。STZ即链脲佐菌素streptozocin简称，是一种小片状或者棱柱状结晶体，能溶于水。大鼠5/6shen切除后shen脏特征性改变有:shen脏早期代偿性肥大的,shen小球高灌注、高滤过、高压力，继之出现shen小球硬化、毛xi血管囊萎陷、系膜进行性扩张、小管间质性损害，后者表现为小管细胞萎缩、小管扩张、间质yan症细胞浸润、纤维化，zui终发展为进行性shen功衰。

Y迷宫实验几种常见的行为学测试方法

1、Y迷宫（Y-Maze）交替行为测试原理

Y-迷宫由Dellu F等发明，被广泛应用于功能减退、趋向性、空间工作记忆等研究领域。Y迷宫主要用于研究啮齿类动空间工作记忆，其完全是利用实验动物对新异环境探索的天性，由于动物每次转换探索方向时都需要记住前一次探索过的方向，因此Y型迷宫实验能够有效地测定动物的空间工作能力。(四)孕期应激致子代抑郁模型出生前暴露在应激条件下的SD大鼠，成年期会出现持续的行为、神经内分泌和睡眠结构等改变，如行为焦躁、HPA轴功能亢进、矛盾睡眠增加，并与血浆皮质酮水平高度相关。

1.1 Y迷宫交替行为测试及参数

自制Y迷宫，由3等长臂组成（50cm×18cm×35cm），每两个臂之间夹角为

120度，在中央处各有一个可移动的隔板，迷宫内臂及底部均涂为黑色。参照文献实验操作方法并加以改进，将大鼠放在Y迷宫任意一臂末端，任其自由探索8min，摄像系统记录动物8min的行为变化，记录以下各项指标：①总进臂次数（the total number of entries）：动物进入迷宫臂的次数（以大鼠四只脚均进入臂为进臂一次标准）；②轮流（交替）一次（an alternation）：依次连续进入Y迷宫全部三个臂一次。③*大轮流次数（The number of maximum alternati）：总进臂次数-2。自发轮流行为得分=总轮流次数/*大轮流次数*。因此，模型实验结论的正确性只是相对的，终必须在人体身上得到验证。